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重组动物细胞因子牛白细胞介素和猪α-干扰素的研制与应用

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登记号:G20170989

所属行业:卫生和社会工作

学科分类:家畜病毒学;家畜病毒学;兽医卫生检疫学;

关键词: 研制 应用 细胞因子 猪α-干扰素 牛白介素

绿色分类:生态畜牧业;

  • 基本信息
成果名称: 重组动物细胞因子牛白细胞介素和猪α-干扰素的研制与应用
成果登记号: G20170989 学科分类: 家畜病毒学;家畜病毒学;兽医卫生检疫学;
绿色分类: 生态畜牧业; 项目关键词: 研制  应用  细胞因子  猪α-干扰素  牛白介素
推荐单位:

上海市农业科学院

成果所处阶段:
合作方式: 成果所属行业: 卫生和社会工作
国家/地区: 上海 知识产权: 发明专利,其他
简介: 点击查看
该项目属于农业生物技术领域的技术开发类研究。 相关研究表明动物和人类细胞因子(cytokine)参与机体的免疫调节过程。人工合成或提取的细胞因子可优化疫苗免疫效果或直接用于抗病毒治疗。2001年以来,我们成功研制了动物细胞因子重组牛白细胞介素-2(recombinant bovine interleukin-2, rbIL-2)和重组猪α干扰素(recombinant porcine interferon-α,rpIFN-α)并探索了两种重组细胞因子在动物体内的免疫调节作用和抗病毒活性,为其临床规模化应用打下坚实的技术基础。 研究获得多项技术成果,可简单归纳为以下三个方面: 1.构建牛白细胞介素-2原核系统高效表达载体,创新性地建立了牛白细胞介素-2的变复性技术工艺。在获得牛白细胞介素-2高效表达菌株的基础上,进行了基因工程菌高密度发酵及诱导表达条件的探索,建立了牛白细胞介素-2基因工程大肠杆菌5L-100 L高密度发酵工艺,尤其创新性地建立了基因工程目标蛋白的尿浓度梯度变复性技术工艺(发明专利号:ZL200610024993.1),应用该项技术,牛白细胞介素-2的复性率可达50%以上,纯度大于90%,活性测定效价可达9.6×10E4 IU/mL,每升发酵液可得到活性蛋白1.59克。 2.构建重组猪α干扰素真核系统高效表达载体,创新性地建立了高密度发酵和低温诱导目标蛋白表达的技术工艺。在获得重组猪α干扰素高效表达菌株的基础上,进行了基因工程菌高密度发酵及诱导表达条件的探索,创新性地建立了重组猪α干扰素基因工程毕赤酵母5L-10L高密度发酵生产工艺,分离提取和冻干保存的技术工艺(专利申请号:200910198666.1;200910027525.3)。每升发酵液可得到活性rpIFN-α 3.4g,最高抗病毒活性可达6.7×10E6IU/mL。冻干前原料纯度可达80%以上,冻干制剂品有效期可达2年。 3. 通过细胞和动物实验探索了重组牛白细胞介素-2的免疫增强作用和重组猪α干扰素的抗病毒活性。实验证明重组牛白细胞介素-2可提高猪蓝耳病疫苗和猪瘟疫苗抗体滴度50%以上,而且有助于免疫抗体高水平的维持;重组猪α干扰素具有明显的抗猪蓝耳病毒的作用,表现为减轻症状,降低血液病毒栽量,延缓死亡时间等。产品经上海、浙江、山东等地的养猪企业较大规模临床试用,证明两种细胞因子联合应用可提高猪瘟、猪蓝耳病等疫苗的免疫抗体滴度,降低猪群的发病率和死亡率,产生了较为显著的经济社会效益。 研究申报3项发明专利,其中1项已获授权并实现技术转让;国内外发表论文29篇,其中SCI、EI论文9篇。
姓名: 王建明 性别:
出生日期: 职务:
国籍(地区): 联系地址:
电子邮件: kyc2@saas.sh.cn
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