该课题以构建一种高效安全的肺靶向siRNA传递系统为目标。课题组首先尝试以DNA重组技术为基础，构建一条基因表达序列：mVEGF-KH-TAT。其中，mVEGF为小鼠血管内皮生长因子基因片段，TAT为穿膜肽片段。测序表明，成功得到了含有该序列的表达质粒。将上述得到的质粒转化入相应的工程菌进行原核表达。课题组考察了目的重组序列在不同载体以及不同原核表达系统中的诱导情况；同时课题组也对各种表达条件进行了优化。但由于表达的目的蛋白中含有大量碱性氨基酸，对原核表达宿主菌有很大毒性，未能检测到目的蛋白的表达。在后续工作中，课题组选取牛血清白蛋白(BSA)为载体，再将阳离子材料通过化学手段连在蛋白上，使其具有携载siRNA的能力。通过缩合剂EDCI，可将乙二胺上的氨基与BSA表面的羧基缩合，生成酰胺键，成为阳离子化的BSA，命名为CBSA。经过SDS-PAGE和阳离子交换层析等方法验证了产物合成成功。接下来课题组考察了CBSA/siRNA复合物的形成。结果表明，CBSA能很好的与siRNA形成稳定的纳米粒，粒径在150nm-250nm之间，zeta电位为15mV到30mV之间，透射电镜观察到形成的纳米粒是较为规整的球形颗粒。CBSA对siRNA的包封率达到94.89%±0.27%。同时，与该复合物能很好地保护siRNA抵御RNA酶或小鼠血清的降解作用。另一方面，CBSA能够明显提高siRNA进入细胞的能力，且CBSA/siRNA主要通过网格蛋白介导的内吞作用进入细胞。通过MTT考察了CBSA/siRNA的毒性，在较大的浓度范围内(小于2μg/mL)，CBSA没有表现出明显的毒性。最后课题组考察了CBSA/siRNA体内分布的情况，相比游离核酸和商品化阳离子脂质体(Lipofectamine2000)组，CBSA可以明显提高siRNA在肺部的分布，显示出良好的肺靶向性。综上所述，该研究利用化学方法连接蛋白与阳离子材料，构建了新型的基因载体，实现了肺部靶向基因传递的目的。在该基金项目的资助下，课题组共发表SCI论文7篇，影响因子均在3以上，最高影响因子7.4；在国际会议2上进行分会报告2次，培养研究生3名。项目负责人，2012年荣获“中国药学会-石药青年药剂奖”；2011年荣获第十一届四川省青年科技奖；作为第3完成人，2011年荣获四川省科技进步一等奖。