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番茄抗蚜虫茸毛基因Wo的克隆和鉴定

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登记号:G20176782

所属行业:农、林、牧、渔业

学科分类:农学;

关键词: 番茄 基因克隆 害虫防治

绿色分类:生态农业;

  • 基本信息
成果名称: 番茄抗蚜虫茸毛基因Wo的克隆和鉴定
成果登记号: G20176782 学科分类: 农学;
绿色分类: 生态农业; 项目关键词: 番茄  基因克隆  害虫防治    
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成果所处阶段:
合作方式: 成果所属行业: 农、林、牧、渔业
国家/地区: 湖北 知识产权: 其他
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植物表皮毛作为一种特化的单细胞或多细胞表皮结构,是研究植物细胞分化调控的一种模式系统。拟南芥单细胞茸毛的发育调控机理研究比较深入,而番茄多细胞茸毛研究较少,它们具有与单细胞茸毛不同的调控途径。植物体表皮茸毛是具有抵御植食性害虫而进化出的防御机制。在番茄中已利用茸毛材料育成商业化品种,它是利用番茄茸毛突变抗蚜虫的特性,并能防止蚜传病毒CMV的感染。该研究拟利用番茄茸毛突变体LA3186和渐渗系IL2-3、IL2-5为亲本材料,构建遗传分离群体,将Wo基因定位于约200Kb的物理区间,该区段含有19个可能的ORFs。其中ORF-4编码730aa,与拟南芥中调控表皮分化的基因PDF2具有73%的同源性。因此,课题组将ORF-4作为候选基因。序列分析发现在该基因的编码区内发生了由胞嘧啶(C-1904)向鸟嘌呤(G)的转变,而且造成了由脯氨酸(Pro-635)向精氨酸(Arg)的转变。通过超量和抑制该基因的表达证明该基因控制茸毛的形成,即为Wo基因。同时,等位基因序列分析证明该位点3个等位基因均发生了单碱基替换,从而导致氨基酸的替换。RT-PCR和原位杂交实验表明该基因的表达部位与茸毛形成密切相关。转录分析发现细胞周期蛋白SlCycB2在茸毛突变体高表达,转基因分析确定该基因也参与番茄茸毛的形成。Y2H和BiFC分析证明Wo与SlCycB2存在蛋白互作。推论:Wo通过蛋白互作的方式促进细胞周期相关基因-SlCycB2的表达,从而促使细胞从G2期向M期的转换,最终促进表皮毛的形成。

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